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原代細(xì)胞分離培養(yǎng)技術(shù)主要應(yīng)用在哪些方面？

原代細(xì)胞分離培養(yǎng)是指通過(guò)體細(xì)胞分離，分離出一組同質(zhì)性的細(xì)胞群體，并在合適的營(yíng)養(yǎng)液和環(huán)境條件下，使其在體外繁殖生長(zhǎng)的過(guò)程。這種細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)被廣泛應(yīng)用于生物學(xué)、醫(yī)學(xué)、細(xì)胞和遺傳工程等領(lǐng)域，是現(xiàn)代生物技術(shù)的基礎(chǔ)。原代細(xì)胞分離培養(yǎng)的過(guò)程較為復(fù)雜，首先需要獲得生物組織的細(xì)胞，對(duì)于不同來(lái)源的細(xì)胞，其分離技術(shù)也不盡相同。例如，從動(dòng)物組織中獲取細(xì)胞，可以采用膠原酶切割的方法，以便使細(xì)胞更容易分離。而從植物體中取得細(xì)胞，則需要去除胚乳和子葉，然后通過(guò)針管分離的方法，將細(xì)胞挑選出來(lái)。每一種分離方...

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胎牛血清FBS可以用在哪里？

胎牛血清FBS用作真核細(xì)胞體外細(xì)胞培養(yǎng)的生長(zhǎng)補(bǔ)充劑。動(dòng)物血清（牛血清和其它動(dòng)物血清）都用于細(xì)胞培養(yǎng)，其中使用廣泛的是胎牛血清（FBS）。FBS含有生長(zhǎng)因子和極低水平的抗體，因此在許多不同的細(xì)胞培養(yǎng)應(yīng)用中具有多功能性。在FBS中發(fā)現(xiàn)了1000多種成分，包括蛋白質(zhì)，電解質(zhì)，脂質(zhì)，碳水化合物，激素，酶和其他不確定的成分，這些成分在許多培養(yǎng)條件下對(duì)于支持細(xì)胞生長(zhǎng)都是必需的。與其它類型血清相比，胚胎期動(dòng)物血清含有更多的生長(zhǎng)因子，及較少的gamma球蛋白含量。此外，跟新生動(dòng)物血清和成體動(dòng)...

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細(xì)胞功能研究都研究些什么？

細(xì)胞是組成機(jī)體結(jié)構(gòu)和功能的基本單位，所以細(xì)胞的功能是生理學(xué)中一項(xiàng)重要的研究?jī)?nèi)容。細(xì)胞膜也稱質(zhì)膜，主要由脂質(zhì)和蛋白質(zhì)組成，還有少量糖類物質(zhì)。一般而言，功能活躍的細(xì)胞，膜蛋白含量較高；而在功能簡(jiǎn)單的細(xì)胞，則膜蛋白含量較低。目前以液態(tài)鑲嵌模型學(xué)說(shuō)為主。細(xì)胞功能研究都研究些什么？細(xì)胞的基本功能：1、細(xì)胞膜的物質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)功能：2、細(xì)胞的電活動(dòng)：包括兩大類：靜息電位和動(dòng)作電位。（1）靜息電位：安靜時(shí)細(xì)胞膜兩側(cè)處于外正內(nèi)負(fù)的狀態(tài)稱為靜息電位，又稱為極化。產(chǎn)生原因：鈉泵的生電效應(yīng)使膜內(nèi)負(fù)值增大，...

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要根據(jù)實(shí)際情況選擇適合的細(xì)胞凋亡檢測(cè)方法

細(xì)胞凋亡（apoptosis）是一種在多細(xì)胞生物體中發(fā)生的程序性細(xì)胞死亡形式，屬于細(xì)胞的正常生理過(guò)程，在生物體進(jìn)化、內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)定以及發(fā)育過(guò)程中起著重要作用，具有重要生物學(xué)意義及復(fù)雜的分子生物學(xué)機(jī)制。在生物學(xué)研究過(guò)程中常常需要檢測(cè)細(xì)胞凋亡情況。目前至少有十?dāng)?shù)種檢測(cè)細(xì)胞凋亡的方法，大致可分為基于細(xì)胞形態(tài)、生物學(xué)功能和生化標(biāo)記三大類。每一方法都有其優(yōu)缺點(diǎn)，需要根據(jù)實(shí)際情況選擇適合的細(xì)胞凋亡檢測(cè)方法。1、電子顯微鏡檢測(cè)方法在透射電鏡下，凋亡細(xì)胞體積變小。凋亡Ⅰ期（pro-apopto...

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充質(zhì)干細(xì)胞都具有哪些基本特性？

充質(zhì)干細(xì)胞是組織的建造者和功能維持者：在組織形態(tài)發(fā)生中負(fù)責(zé)搭建腳手架，分化出骨骼、軟骨、脂肪、纖維等結(jié)締組織，構(gòu)成器官發(fā)育框架結(jié)構(gòu)；而且，間充質(zhì)干細(xì)胞可以分泌數(shù)十種因子，為各種分化細(xì)胞提供所需營(yíng)養(yǎng)。其基本特性包括：1、強(qiáng)大的增殖能力和多向分化潛能：在適宜的體內(nèi)或體外環(huán)境下分化為成骨細(xì)胞、軟骨細(xì)胞、脂肪細(xì)胞、肌細(xì)胞、神經(jīng)細(xì)胞、肝細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞、基質(zhì)細(xì)胞等多種細(xì)胞的能力。2、免疫調(diào)節(jié)功能：通過(guò)細(xì)胞間的相互作用及產(chǎn)生細(xì)胞因子干擾樹(shù)突狀細(xì)胞功能并抑制T細(xì)胞的增殖及其免疫反應(yīng)，從而發(fā)揮...

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耐藥細(xì)胞株的服務(wù)內(nèi)容包括哪些？

耐藥細(xì)胞株一般采用體外低濃度遞增梯度結(jié)合大劑量間歇沖擊的方法，誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞對(duì)特定藥物產(chǎn)生耐藥性，從而建立相應(yīng)的耐藥細(xì)胞系。細(xì)胞株的服務(wù)內(nèi)容包括哪些？1、在體外，低濃度梯度遞增結(jié)合大劑量間歇沖擊誘導(dǎo)細(xì)胞產(chǎn)生耐藥性。2、藥物對(duì)親代細(xì)胞和耐藥細(xì)胞的IC50用2。MTT法，計(jì)算耐藥指數(shù)。目前已知的體外建立耐藥細(xì)胞株的方法有幾種:高劑量藥物沖擊法、提高藥物濃度法、提高藥物濃度與高劑量藥物沖擊相結(jié)合法、轉(zhuǎn)基因藥物篩選法。其中，常用增加藥物濃度法和大劑量藥物沖擊法建立腫瘤細(xì)胞化療耐藥模型。...

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工具細(xì)胞株具有高轉(zhuǎn)染率、實(shí)驗(yàn)周期短的特點(diǎn)

細(xì)胞株通過(guò)選擇法或克隆形成法從原代培養(yǎng)物或細(xì)胞系中獲得具有特殊性質(zhì)或標(biāo)志物的培養(yǎng)物稱為細(xì)胞株，是用單細(xì)胞分離培養(yǎng)或通過(guò)篩選的方法，由單細(xì)胞增殖形成的細(xì)胞群。細(xì)胞株的特殊性質(zhì)或標(biāo)志必須在整個(gè)培養(yǎng)期間始終存在。特殊性質(zhì)或標(biāo)志必須在整個(gè)培養(yǎng)期間始終存在。對(duì)于人類腫瘤細(xì)胞，在體外培養(yǎng)半年以上，生長(zhǎng)穩(wěn)定，并連續(xù)傳代的即可稱為連續(xù)性株或系。細(xì)胞株的建立實(shí)驗(yàn)是通過(guò)細(xì)胞與低劑量的藥物長(zhǎng)期接觸，引起細(xì)胞本身生物化學(xué)過(guò)程的改變，細(xì)胞膜上出現(xiàn)Pgp(或P-170)糖蛋白，使細(xì)胞逐漸對(duì)藥物耐受。工具...

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標(biāo)記細(xì)胞株的分離和培養(yǎng)要注意些什么？

標(biāo)記細(xì)胞株是細(xì)胞系中特定標(biāo)簽（Luc、GFP、RFP等）的穩(wěn)定轉(zhuǎn)移，該細(xì)胞系可用作示蹤細(xì)胞，為細(xì)胞成像和體內(nèi)成像提供了很大的便利。標(biāo)記細(xì)胞株的分離和培養(yǎng)：1、在無(wú)菌條件下，取出1-3DSD大鼠的心房組織，然后用PBS清洗組織塊兩次，然后將組織切成1mm3左右；2、在組織塊中加入4ml酶消化液（0.1%胰蛋白酶和0.1%Ⅰ型膠原酶），懸停10s，37℃消化10min，然后用滴定管吹成單細(xì)胞懸液，自然沉淀收集取上清，用10%fbs培養(yǎng)基消化終止后置于4℃；3、剩余組織加入3～4m...

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