在細(xì)胞生物學(xué)研究、生物制藥等前沿領(lǐng)域,細(xì)胞培養(yǎng)基為細(xì)胞生長繁衍提供關(guān)鍵養(yǎng)分與適宜環(huán)境。掌握其正確使用方法,才能讓細(xì)胞蓬勃生長,助力科研突破與產(chǎn)業(yè)革新。
開啟培養(yǎng)前,依據(jù)細(xì)胞種類、實(shí)驗?zāi)康暮Y選培養(yǎng)基,如貼壁生長的癌細(xì)胞系多用含血清、葡萄糖、氨基酸及多種生長因子的RPMI-1640培養(yǎng)基;原代細(xì)胞培養(yǎng)常選營養(yǎng)成分豐富、成分貼近體內(nèi)環(huán)境的DMEM培養(yǎng)基,且需添加適量抗生素,像青霉素、鏈霉素,防止微生物“偷襲”,搭建安全“保育箱”。
配制環(huán)節(jié)嚴(yán)格按說明書稱取培養(yǎng)基粉末,溶解于超純水中,用磁力攪拌器均勻混合,避免局部濃度過高“灼傷”細(xì)胞。調(diào)節(jié)pH值至7.2-7.4區(qū)間,近似人體生理環(huán)境,可用精密pH計監(jiān)測,配合碳酸氫鈉溶液或鹽酸溶液微調(diào),確保酸堿適度,為細(xì)胞營造舒適“棲息地”。
超凈工作臺提前紫外消毒30分鐘,操作者穿戴無菌衣帽、手套,所有器械經(jīng)高溫高壓滅菌。從吸取培養(yǎng)基到接種細(xì)胞,動作輕柔連貫,杜絕外界雜菌混入,一旦污染,細(xì)胞生長將陷入混亂,實(shí)驗前功盡棄。

細(xì)胞接種密度也有講究。不同細(xì)胞系有各自適配密度,過密易致營養(yǎng)匱乏、空間不足,細(xì)胞凋亡;過疏則浪費(fèi)資源、難以形成生長優(yōu)勢。一般傳代細(xì)胞以每平方厘米數(shù)千個細(xì)胞為宜,原代細(xì)胞稍密。
日常換液與維護(hù)不可懈怠。定期吸除舊培養(yǎng)基,補(bǔ)充新鮮“養(yǎng)分”,維持細(xì)胞活性,觀察細(xì)胞形態(tài)、密度變化,及時傳代或調(diào)整培養(yǎng)條件,依據(jù)細(xì)胞狀態(tài)靈活應(yīng)變,讓這片“生命溫床”持續(xù)孕育希望,為科研產(chǎn)出、藥物研發(fā)源源不斷輸送優(yōu)質(zhì)細(xì)胞“原料”。
細(xì)胞培養(yǎng)基的使用,從選材配制到無菌操作、接種養(yǎng)護(hù),步步精心。遵循規(guī)范流程,方能解鎖細(xì)胞生長密碼,驅(qū)動生命科學(xué)車輪滾滾向前。